SEMANA 18- 6/11

PROYECTO QUIMICA ORT DEL GENOMA HUMANO

Investigación en bioquímica molecular y proteómica 2008

Por cuarto año consecutivo los alumnos del último año de la especialidad Química de la Escuela Técnica ORT Argentina realizarán sus proyectos finales en distintas universidades y centros de investigación con profesionales reconocidos. La metodología de trabajo evita la transpocisión didáctica permitiendo a los estudiantes realizar su actividad final en los lugares donde se está generando el conocimiento.

La articulación entre el nivel medio y el postgrado universitario es auspiciada por el CONICET (Consejo Nacional de Investigación Científica y Técnica).

Los proyectos de investigación para el año en curso son:

1) Evaluación de la expresión de la molecula de adhesión cadherina epitelial en tejidos humanos normales y tumorales.

Investigador: Dra. Mónica Vazquez-Levin.

Instituto: Instituto de Biología y Medicina Experimental(IBYME - CONICET).

Alumnos: Yael Dobzewicz Y Gala Szapiro.

Blog: http://www.proyecto-6q.blogspot.com/

2) Acción del hexaclorobenceno (HCB) sobre la uroporfirinogeno de una línea celular hepatocitos humanos. Mecanismo de acción.

Investigador: Dra. María del Carmen Ríos de Molina.

Instituto: Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.

Alumnos: Lucas Toiw y Uriel Frid.

Blog: http://www.proyectofrid-toiw08.blogspot.com/

3) Modelos experimentales de enfermedades metabólicas: Porfiria y Síndrome Metabólico. Proteómica y Metabolómica de estos disturbios.

Investigador: Dra. Marta Blanca Mazzetti.

Instituto: Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA).

Alumnos: Maria Duperron y Mauro Elencwajg.

Blog: http://www.proyectofinal6q.blogspot.com/

4) Factores no hemodinámicos relacionados con la génesis y evolución de la proteinuria durante la enfermedad renal progresiva.

Investigador: Dra. Elsa Zotta.

Instituto: Laboratorio de Fisiopatogénia, Departamento de fisiología, Facultad de medicina, UBA.

Alumnos: Barbara Helueni y Melanie Naiman.

Blog: http://www.proyectoq08.blogspot.com/

5) Estudio de la participacion de la anandamida en la regulacion de la interaccion espermatozoide-ovioducto en un modelo bovino.

Investigador: Dra. Silvina Perez Martinez.

Instituto: Facultad de medicina - UBA.

Alumnos: Judith Arenas Tenenbaum y Melina Braverman.

Blog: http://www.scienceproject08.blogspot.com/

6) El estudio de los mecanismos moleculares involucrados en la regulación del gen UGA4 de Saccharomyces cervisiae en respuesta a cambios en la disponibilidad de nutrientes con el fin de dilucidar las distintas cascadas de señales desencadenadas por dichos nutrientes y establecer sus interconexiones.

Investigador: Dra Susana Correa García.

Instituto: Departamento de Química Biologica, Facultad de ciencias Exactas y Naturales, UBA.

Alumnos: Iván Mikiej y Victoria Salama

Blog: http://www.proyectoquimica22.blogspot.com/

7) Diagnóstico de la enfermedad de Von Willebrand (VWD) tipo 2N por técnicas fenotípicas y genotípicas.

Investigador: Dra. Adriana I. Woods.

Instituto: Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex" de la Academia Nacional de Medicina.

Alumnos: Abigail Skverer y Daniela Lin

Blog: http://www.vwd-diagnostico.blogspot.com/

8) Estudio de la mielinogenesis en el sistema nervioso periferico en condiciones fisiologicas y patologicas. Participacion de celulas pluripotentes en el proceso de degeneracion-regeneracion nerviosa.

Investigador: Dra Patricia Setton-Avruj.

Instituto: Departamento de Quimica Biologica, Facultad de Farmacia y Bioquimica (IQUIFIB-UBA-CONICET).

Alumnos: Averbuj Daniel y Eitan Rozenszajn.

Blog: http://www.proyectoaverbuj-rozenszajn.blogspot.com/

9) Diseño y desarrollo de vacunas antitumorales empleando bacterias y celulas tumorales modificadas con genes inmunomodiladores. Estudio de los mecanismos inmunes inducidos.

Investigador: Claudia I. Waldner y Claudia Mongini.

Instituto: Laboratorio de inmunologia celular y molecular. Centro de Estudios Farmacologicos y Botanicos (CEFYBO. CONICET-UBA)

Alumnos: Amalia Surijon y Maria Belen Tolava Rivero.

Blog: http://www.amibeluproyecto.blogspot.com/

10) Marcadores Geneticos Asociados al Cáncer.

Investigador: Dr.Javier Hernán Cotignola.

Instituto: Laboratorio de Cáncer y Apoptosis del Departamento de Quimica Biologica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la UBA.

Alumnos: Ayelén Marano y Solange Perchik

Blog: http://www.marcadoresgeneticos.blogspot.com/

11) Expresion del canal de la conductancia transmembranal de la Fibrosis Quistica (CFTR) en placentas Preeclampticas: posible rol en la regulacion de la actividad de la Acuoporina-9 (AQP9).

Investigador: Dr Alicia E Damiano.

Instituto: Catedra de Biologia Celular, Departamento de Ciencias Biologicas, Facultad de Farmacia y Bioquimica (UBA)

Alumnos: Gabriel Colodenco y Martín Sapir.

Blog: http://proyectofinalcs.blogspot.com/

12) Proteómica de factores secretados por células de cáncer de mama y mama normal con capacidad inhibitoria de la producción lipídica.

Investigador: Dra.Guerra de Grignoli Liliana Noemi.

Instituto: Departamento de Ciencias biologicas. Facultad de ciencias exactas y naturales, UBA-CONICET.

Alumnos: Fabiana Durante y Tamara Broitman.

Blog: http://tyf-proyecto08.blogspot.com/

13) Estudio de la Growth Associated Protein (GAP-43), su interacción con la Ubicutina y su participación en el control del ciclo celular en células NIH3T3 transfectadas en forma estable y transiente. Efecto de la Apo-transferrina en la remielización: participación de la vía Notch en la diferenciación oligodendrioglial.

Investigador: Dra Ana M. Adamo

Instituto: Departamento de Química Biológica Patológica, Facultad de Farmacia y Bioquímica de la UBA. CONICET.

Alumnos: Rodrigo C. Pampin y Robby Mattes

Blog: http://gap-43.blogspot.com/

14) Interacción de sumo-1 y mage-a2 en la regulacion del oncosupresor p53

Investigador: Martín Monte

Instituto: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA)

Alumnos: Leonel Stermann y Yair Litman

Blog: http://proyectosumo.blogspot.com/

15) Neovascularización en un modelo murino de inflamaciòn aguda inducida por LPS.

Investigador: Eulalia de la Torre.

Instituto: Facultad de Medicina - Uba - Laboratorio de Inmunofarmacologia

Alumnos: Federico Mauas Walach, Pablo Kuleff.

Blog: http://finalproyectort.blogspot.com/

Hoy, en nuestra semana número 18, comenzamos a redactar junto a la investigadora lo que sería nuestra monografía sobre la investigación que estuvimos realizando. La misma la subiremos la semana que viene cuando este terminada. Además comenzamos a preparar la presentacion de dicha monografía. Esperamos que salga todo como lo preparamos, hasta la próxima!

Barbi y Melu.

SEMANA 17- 30/10

Hoy comenzamos a recolectar todos los resultados obtenidos durante la pasantía. Junto a la investigadora pudimos debatir y refrescar conocimientos que fuimos adquiriendo en estos últimos meses. La semana próxima comenzaremos a pensar lo que irá en la monografía.
Esto fue todo por ahora, hasta la próxima!
Barbi y Melu.

SEMANA 16- 23/10

Hoy continuamos con lo que habíamos empezado la semana pasada, la IHQ para corroborar la expresión de la megalina en ratas experimentales. Los resultados que obtuvimos fueron comparados con IHQ realizadas en ratas control (sin toxina) y son los siguientes:

En las fluorescencias se puede observar como en las ratas controles se expresa la señal para la megalina en membranas y citoplasma de túbulos proximales. En cambio, en las ratas experimentales se puede observar la detección de dichas señales en membrana y en el citoplasma basolateral.
Si bien por este medio las imágenes no se pueden apreciar tal cual son, nosotras pudimos verlas con mejor definición.
Esto fue todo por ahora, hasta la próxima!
Barbi y Melu.

SEMANA 15- 16/10

Hoy realizamos una Inmunohistoquímica(IHQ) para verificar si la megalina, la cual se encuentra en la membrana epitelial del túbulo proximal, absorbe las proteínas que pasan por allí para que luego estas vuelvan al capilar y no se filtren en la orina (evitar proteinuria).
La megalina se expresa en las células que están en la membrana epitelial del túbulo proximal. Realizamos la IHQ para verificar la presencia de la megalina mediante su expresión. Para realizarla utilizamos un anticuerpo primario y uno secundario (este ultimo marcado con fluorescencia). La megalina al ser un antígeno poco común, no dispone de un anticuerpo primario el cual ya este marcado con fluorescencia. Es por esto que a la megalina le agregamos el anticuerpo primario (que es anticuerpo para la megalina) para que se unan y luego le agregamos el anticuerpo secundario (marcado con fluorescencia) el cual es anticuerpo del primario, es por esto que el secundario se unirá con el primario y así podremos ver la expresión de la megalina. Esta IHQ es de forma indirecta ya que debimos utilizar dos anticuerpos.
Los resultados los veremos la semana que viene, hasta la próxima!
Barbi y Melu.

SEMANA 14- 9/10

Una semana despues, luego de haberlo dejado toda la noche en albúmina para poder limpiar y permitir que solo esten presentes las proteínas buscadas, y para que el anticuerpo reconozca las mismas. Luego de transcurrido ese tiempo, lo colocamos en Buffer PBS-Tween (PBS-lava, Tween, que es como un "detergente"). Este "detergente" permite quitar la albumina y permitir que el anticuerpo se pueda pegar.

Por último le incorporamos el anticuerpoprimario y secundario.

Una hora y media despues... obtuvimos los siguientes resultados:

En estos resultados se pueden ver como la podocalixina esta casi ausente en la rata experimental, lo cual nos indica que esta proteina dismunuye en el glomerulo. Por otro lado, la nefrina disminuye pero a un nivel menor comparando con la presencia de la podocalixina, lo cual nos podria indicar que la proteinuria en el SUH se debe a la mala filtracion de la nefrina y de la podocalixina en el glomerulo.

Esto fue todo por ahora, hasta la proxima!

Barbi y Melu!

SEMANA 13- 2/10

Hoy realizamos un Western Blot para ver si los niveles de la podocalixina y de la nefrina sufrian alguna alteracion en ratas experimentales. Para esto experimentamos en el mismo Western, con una muestra de una rata control (sin toxina) y una muestra de una rata experimental (con toxina).
La técnica es un método que se utiliza tanto en biología molecularcomo en bioquímica e inmunogenética para la detección de proteínas en una muestra de un tejido homogeneizado o de un extracto. Para esto se implementa un gel de electroforesis para asi separar proteínas desnaturalizadas de la masa. Las proteínas son transferidas desde el gel hacia la membrana (originalmente de nitrocelulosa), donde son examinadas utilizando anticuerpos específicos para la proteína. Utilizando esta técnica se pueden examinar la cantidad de proteínas en una muestra y comparar los niveles de presencia entre varios grupos.
En nuestro caso, como queriamos identificar la presencia de dos proteínas (podocalixina y nefrina) las cuales tienen diferente peso molecular, preparamos el gel poliacrilamida con diferentes concetraciones para que asi cada proteína pueda correr por el gel correspondiente. La nefrina al ser la de mayor peso molecular, lo preparamos al 10%, mientras que el gel de la podocalixina lo preparamos en 7.5%.
Los geles los preparamos de la siguiente manera:

7,5 % 10%
(podocalixina) (nefrina)

Acilamida 3,8 ml 5ml

Tus pH 8,8 3,75ml 3,75ml

SDS 10% 0,15ml 0,15ml

APS 10% 60μ 60μ

Temed 8μ 8μ

H2O d 7,4ml 6,1ml

Esta experiencia nos duro mas de un dia, es por eso que los resultados los obtendremos la proxima semana.

Hasta la proxima,
Barbi y Melu.

INTRODUCCION

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Hola!
Queremos decirles que ya subimos la introducción del proyecto final. Para visualizarla mejor pueden entrar al sitio http://www.scribd.com/doc/5368198/INTRODUCCION
Esperamos que la disfruten
Hasta la próxima!
Barbi y Melu